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免疫学实验常用试剂
小鼠单克隆抗体Ig类/亚类/轻链型鉴定试剂盒(胶体金法)
产品使用说明书
在您使用本产品前请认真阅读说明书,这对您顺利完成实验很有帮助。
一、试剂原理:本试剂盒为胶体金双抗体夹心法,可以用来鉴定小鼠淋巴细胞杂交瘤培养上清中的单克隆抗体的Ig类和亚类以及轻链型。它采用小鼠抗体共有位点的优选二抗标记胶体金,与加入的杂交瘤细胞培养上清中的小鼠抗体结合后继续上爬至不同位置,再与相应位置包被的不同抗小鼠亚类亚型和轻链型抗体发生结合,形成红色胶体金聚集线,IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA\Kappa\Lambda八项数据可以一次性测得。本试剂盒具有特异性好,使用简单方便,结果准确可靠。是您鉴定小鼠单克隆抗体Ig类、亚类、轻链型的可靠工具。
二、试剂组份:
检测卡(铝箔袋装) | 10卡/5卡/2卡 |
标本稀释液 | 3mL/1.5ml/0.6ml |
说明书 | 一份 |
附图:(检测卡图示)
(注意:下方两个圆孔处是加样孔,上方两个长方形框为结果观察窗口)
三、使用范围:用于杂交瘤细胞培养上清中小鼠单克隆抗体Ig类、亚类、轻链型的鉴定以及相关内容的研究。
四、使用方法:
1、首先将试剂盒从2-8℃恢复室温(大约30分钟)。
2、取出检测卡撕开铝箔袋将检测卡平放在实验台面,将一株杂交瘤细胞上清在两个加样孔各加20µL,然后将标本稀释液加入两个加样孔各100ul。
3、一般建议在5分钟-10分钟内观察结果,不要超过20分钟。C线为质控线正常情况都是必须显色的,如果不显色说明检测异常。正常情况下IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA这6个位置会有一个位置显色,对应即为重链数据!K和λ表示Kappa和Lambda此处也会有一个位置显色,对应即为轻链型。总结一下正常检测一共有4条线显色,2个质控线C,1个重链显色和1个轻链显色。
4、记录并拍照结果备用。
六、保存条件:建议保存在4℃(或2~8℃),保存有效期18个月。
七、注意事项:
1、虽然本试剂盒过期后半年可能还有使用价值但还是请您在有效期内使用。
2、非细胞培养上清方式的样品不建议检测,如若检测尽量选用抗原亲和的单抗。另外大规模无血清培养的抗体可以测上清也可以测纯化抗体(此时不要求纯化方法)。直接测纯化抗体时抗体浓度建议调整到10µg/mL以内,加样20µL。
3、杂交瘤细胞不能混有腹腔收集的饲养细胞。因为里面的淋巴细胞可能会分泌多种类型抗体影响结果。
4、检测卡铝箔打开后10分钟内尽快使用,不要打开后又存放起来,受潮后易变质。
5、如果C线不出结果,大概率失效。请检查试剂有效期,有效期内请联系我们技术团队获得支持。
6、本试剂一般不会出现两个重链或轻链阳性,但出现两个阳性的现象现实中是真实存在的,一般会一个显色很深,另一个很低但却还能看见,实验分析表明这种情况下以深值对应为准,出现这种情况有多重原因:A、培养的细胞中有“饲养细胞”残留,B、由于单抗研制存在人工干预步骤因此抗体本身有可能会存在亚类结构上的轻微变异, C、样品为非特异亲和纯化的抗体或样品是腹水,D、上清出现少量污染,E、实验操作和环境过于粗放。
特别提示:不具备相关基础知识和操作的人员不要完成此实验或类似实验,因为这可能会给您带来错误的结果和不必要的损失,实验中有疑问请联系我们技术团队BIOABLAB@163.com
货号:6218
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